{"id":231,"date":"2023-07-10T11:11:51","date_gmt":"2023-07-10T14:11:51","guid":{"rendered":"https:\/\/cursaueducacao.com.br\/blog\/?p=231"},"modified":"2024-09-18T13:39:01","modified_gmt":"2024-09-18T16:39:01","slug":"tipos-de-elisa","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/cursaueducacao.com.br\/blog\/tipos-de-elisa\/","title":{"rendered":"Quais s\u00e3o os tipos de ELISA?"},"content":{"rendered":"\n

Voc\u00ea sabe a diferen\u00e7a entre os tipos de ELISA? Lembra qual o princ\u00edpio de cada um? E em quais situa\u00e7\u00f5es eles s\u00e3o utilizados? Antes de mais nada, \u00e9 interessante relembrar que o nome ELISA vem do ingl\u00eas (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), e nada mais \u00e9 do que um teste enzim\u00e1tico baseado na liga\u00e7\u00e3o ant\u00edgeno-anticorpo. O teste de ELISA \u00e9 conhecido por sua alta sensibilidade e especificidade, \u00e9 uma t\u00e9cnica amplamente utilizada para detectar e diagnosticar uma variedade de subst\u00e2ncias.<\/p>\n\n\n\n

T\u00e1, mas quais s\u00e3o os tipos de ELISA e qual a diferen\u00e7a entre eles?<\/strong><\/h4>\n\n\n\n
ELISA Direto<\/strong><\/h5>\n\n\n\n

Esse \u00e9 o tipo mais simples e r\u00e1pido de ELISA. Adiciona-se a placa a amostra que supostamente possui o ant\u00edgeno de interesse. Esse ant\u00edgeno ir\u00e1 se adsorver, ou seja, se fixar \u00e0 placa. Em seguida, adicionamos um anticorpo prim\u00e1rio que est\u00e1 conjugado com uma enzima. Geralmente essa enzima \u00e9 a peroxidase. Se houver forma\u00e7\u00e3o de complexo ant\u00edgeno-anticorpo, a enzima ligada ao anticorpo prim\u00e1rio ir\u00e1 catalisar o substrato que \u00e9 adicionado, formando uma rea\u00e7\u00e3o qu\u00edmica que produz cor, indicando a presen\u00e7a do ant\u00edgeno na amostra. Al\u00e9m disso, a intensidade da cor gerada \u00e9 diretamente proporcional a quantidade de ant\u00edgeno presente na amostra<\/strong>. <\/p>\n\n\n\n

Dentre as desvantagens desse m\u00e9todo est\u00e3o inclusas a baixa amplifica\u00e7\u00e3o e sensibilidade. Contudo, podemos resolver esse problema adicionando um anticorpo secund\u00e1rio \u00e0 rea\u00e7\u00e3o, como \u00e9 o caso do ELISA indireto. O ELISA direto tamb\u00e9m \u00e9 menos flex\u00edvel que os outros tipos de ELISA, porque \u00e9 necess\u00e1rio um anticorpo prim\u00e1rio espec\u00edfico para cada ant\u00edgeno-alvo. <\/p>\n\n\n\n

ELISA Indireto <\/strong><\/h5>\n\n\n\n

No ELISA indireto segue-se um passo a passo bem similar ao ELISA direto por\u00e9m \u00e9 um m\u00e9todo mais sens\u00edvel. Ap\u00f3s adicionar a amostra e realizar a adsor\u00e7\u00e3o do ant\u00edgeno \u00e0 placa, adicionamos um anticorpo prim\u00e1rio. A diferen\u00e7a \u00e9 que, em seguida, adicionamos um anticorpo secund\u00e1rio, que \u00e9 espec\u00edfico para o anticorpo prim\u00e1rio com o intuito de amplificar e aumentar a sensibilidade da rea\u00e7\u00e3o. Nesse caso, a enzima estar\u00e1 conjugada ao anticorpo secund\u00e1rio e n\u00e3o ao prim\u00e1rio como no ELISA direto! <\/p>\n\n\n\n

Portanto, se o ant\u00edgeno estiver presente na amostra, o anticorpo prim\u00e1rio se ligar\u00e1 \u00e0 ele e consequentemente, o anticorpo secund\u00e1rio se ligar\u00e1 ao prim\u00e1rio. O sinal ser\u00e1 gerado pela enzima ap\u00f3s o consumo do substrado. Se o ant\u00edgeno de interesse n\u00e3o estiver presente na amostra, o anticorpo prim\u00e1rio n\u00e3o se ligar\u00e1 ao anticorpo secund\u00e1rio e a cor n\u00e3o ser\u00e1 gerada.<\/p>\n\n\n\n

<\/h6>\n\n\n\n
ELISA sandu\u00edche direto <\/strong><\/h5>\n\n\n\n

Nesse tipo de ELISA, um anticorpo espec\u00edfico pr\u00e9-revestido na placa captura o ant\u00edgeno presente na amostra.Em seguida, adicionamos um segundo anticorpo prim\u00e1rio, conjugado com uma enzima, afim de detectar a presen\u00e7a do ant\u00edgeno. Como? Se o ant\u00edgeno est\u00e1 presente na amostra, o anticorpo adsorvido na placa o ter\u00e1 capturado. Ent\u00e3o, o anticorpo prim\u00e1rio se ligar\u00e1 a esse complexo, a enzima consumir\u00e1 o substrato e a cor ser\u00e1 produzida. \u00c9 importante resaltar que cada um desses anticorpos \u00e9 espec\u00edfico para um ep\u00edtopo diferente do ant\u00edgeno, aumentando a especificidade do teste. Esse tipo de ELISA \u00e9 \u00fatil quando o ant\u00edgeno \u00e9 de dif\u00edcil detec\u00e7\u00e3o direta e a grande vantagem \u00e9 a maior sensibilidade em rela\u00e7\u00e3o ao outros tipos de ELISA.<\/p>\n\n\n\n

ELISA sandu\u00edche indireto<\/strong><\/h5>\n\n\n\n

H\u00e1 ainda uma varia desse tipo de ELISA. Nesse caso adicionamos o anticorpo prim\u00e1rio para se ligar ao complexo ant\u00edgeno da amostra – anticorpo da placa e logo em seguida, adiciona-se um anticorpo secund\u00e1rio conjugado \u00e0 enzima, amplificando ainda mais essa rea\u00e7\u00e3o.<\/p>\n\n\n\n

ELISA Competitivo<\/strong><\/h5>\n\n\n\n

O princ\u00edpio b\u00e1sico do ELISA competitivo envolve a liga\u00e7\u00e3o competitiva entre o ant\u00edgeno presente na amostra e o ant\u00edgeno competidor (um ant\u00edgeno j\u00e1 conhecido e adicionado propositalmente) pelo anticorpo. \u00c9 frequentemente usado quando h\u00e1 uma baixa concentra\u00e7\u00e3o do ant\u00edgeno na amostra ou quando deseja-se alta sensibilidade e especificidade. Primeiramente, o ant\u00edgeno competidor \u00e9 adsorvido \u00e0 placa. Em seguida, adicionamos a amostra contendo o ant\u00edgeno de interesse.Depois, adicionamos um anticorpo prim\u00e1rio que se ligar\u00e1 tanto ao ant\u00edgeno competidor quanto ao ant\u00edgeno da amostra (caso esteja presente). Quanto maior a concentra\u00e7\u00e3o do ant\u00edgeno na amostra, menos ant\u00edgeno competidor se ligar\u00e1 ao anticorpo, resultando em uma diminui\u00e7\u00e3o da cor produzida. <\/p>\n\n\n\n

\"a<\/figure>\n\n\n\n

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Refer\u00eancias bibliogr\u00e1ficas: <\/p>\n\n\n\n

Crowther, J. R. (2009). The ELISA guidebook. Humana Press.<\/p>\n\n\n\n

Tijssen, P. (2002). Practice and theory of enzyme immunoassays. Elsevier Science.<\/p>\n\n\n\n

Ritter, N., & Lincoff, A. M. (2016). ELISA: Methods and protocols. Springer Science+Business Media.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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